光または闇の存在によって刺激される可能性のある特定の二次代謝経路があります。ここでは、培地と培養方法に加えて、細胞培養による二次代謝産物の生成に影響を与える他の要因があります。
自然界で起こることと同様に、光はinvitroで特定の文化にプラスまたはマイナスの影響を与える可能性があります。したがって、これは、生成される二次代謝産物のタイプに関しても存在するか、または存在しません。
光は、特定の代謝経路をオンまたはオフにできるスイッチと見なすことができます。存在または不在だけでなく、強度（光の量）、品質（波長）、および光周期（24時間にわたる明暗の時間）の観点からも評価する必要があります。
曝気、つまり酸素と二酸化炭素の関係は、有効成分の生成を刺激または抑制する可能性があるため、細胞を無酸素状態に保つことがバイオ技術者の最終目標にプラスの影響を与えるかどうかを知ることは良いことです。
invitro培養の最適温度は25から30°Cの間で振動します。ただし、正当な例外があります。いずれにせよ、熱変動は、二次代謝産物の生成に何らかの形で介入することができるストレスを表します。
細胞が継続的に異化および異化するため、invitro培養ではpHは時間とともに変化することがよくあります。しかし、それの劇的な変化は、再びアクティブな原則の生成に影響を与える可能性があります。したがって、ケモスタットで常に監視する必要があります。
誘発は、生物的または非生物的の2つの方法で作物に決定されるストレス発生刺激を示す生物工学用語です。誘発、つまりストレスの誘発、非生物的は、UV照射や「重金属の使用」などの物理的ストレスに対応します。 、一方、生物的誘発は、自然界の植物への植物病原体の攻撃を模倣するインビトロストレスに対応します（細胞を病気にしないように注意してください）。したがって、病原体の攻撃に応答した二次代謝産物の生成、培養物は、不要な微生物を破壊するためにオートクレーブ消毒にかけられます。
これらすべての要因は、栽培方法と培地の異なる組成とともに、作物自体が適切に成長し、その二次代謝産物を生成することを可能にします。インビトロで栽培される各植物種は、これらすべての要因の個別の最適化を必要とします;これらの中で、培地中のホルモンの存在もあります。バイオテクノロジー分野で最も使用されるホルモンは、オーキシン、ギベレリン、およびサイトカインです。エチレンはあまり一般的ではありません。アブシジン酸は、体細胞胚の生成を誘導するために使用されます。これらのホルモンクラスの有無、濃度、および定量比は、invitro培養の二次代謝産物の生成や場合によってはある程度の分化ではなく成長を決定します。したがって、ホルモンクラスの存在は、確立された目標に向けて細胞を導くために不可欠です。
バイオテクノロジープロジェクトに着手する前に、細胞培養が逆行する可能性のあるすべての代謝経路を深く知ることが不可欠です。また、これらの経路は一方向であり、一次代謝物から二次代謝物に向かうためです（その逆は決してありません。そのため、一次代謝物は二次代謝物の前駆体です）。
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